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海洋弧菌的检测技术研究进展_张锐

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文档简介:

?4550?中囯环境科学学会学术年会论文集(2017)1目前海洋弧菌的检测技术近十几年,基于一种基于免疫学和分子生物学的新的检测技术和快速检测方法得到发展M,这些检测技术包括:免疫检测技术、核酸检测、核酸检测技术和免疫学的组合。目前,对副溶血弧菌检测的方法中常见的有:传统方法[7]、免疫学方法、分子生物学技术和生物传感器技术[8 ̄9]。对创伤弧菌检测的方法中常见的有:传统分离鉴定法、免疫学方法和DNA探针、PCR等基因检测方法[1°]。对溶藻弧菌检测的方法中常见的有:生化鉴定法、PCR检测方法[11]。对哈维氏弧菌检测的方法中常见的有:分子生物学技术和免疫技术[12]。1.1免疫学检测技术免疫荧光技术是将抗体分子与某些示踪材料结合起来,通过抗原抗体反应检测和定位组织或细胞内抗原物质的标记免疫分析技术。用荧光色素标记的第一抗体或抗原,结合相应的抗原或抗体特异性抗原抗体反应,我们在荧光显微镜下观察荧光,以鉴定和定位样品中相应的抗原或抗体。免疫荧光技术是一种准确、灵敏的快速检测疾病动物病原体的技术。检测不超过3h,为及时治疗疾病争取宝贵时间,同时也检测携带者或不感染者。也可以在活的非可培养菌[13]利用间接免疫荧光技术检测,因为这个状态的细菌是有毒的,并在一定条件下可引起疾病恢复的爆发,从而加强非可培养细菌的检测在水产养殖中的疾病预测预防作用。此外,免疫荧光技术不仅可以快速检测病原微生物的可用于研究在宿主的组织和器官的病原菌的分布,有助于了解致病途径。国外早在20世纪80年代就已有利用该技术进行海洋弧菌检测[14?15],而我国自20世纪90年代开始,也逐步出现了运用免疫荧光技术检测弧菌的报道,得出了免疫荧光法具有简便、快捷、结果易判定的优点。到21世纪,鄢庆枇等和樊景凤等分别建立鳗弧菌和副溶血弧菌的间接免疫荧光抗体检测方[16]。因此,免疫荧光技术中具有广泛的致病性海洋弧菌的检测中的应用[6]。风景峰等人建立间接免疫荧光法检测副溶血性弧菌的检测,对南美白对虾红体病病原菌的[17]。这种方法的优点是特异性高,Vibrioalginolyticus、大肠杆菌、嗜水气单胞菌等细菌的交叉反应,操作简单,可在2h内完成,便于进行标准化检测,可大范围推广。1.2免疫酶

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