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新型机械激活离子通道蛋白Piezo1通过MAPK_ERK1_2信号通路介导软骨细胞凋亡的机制

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·2472·主堡医堂盘查垫!!生!旦!鱼旦筮堑鲞筮!!翅盟型堑鲤』垦!垒坚:垒!鲤堕!!:垫!!:!吐墅z塑!:!!新型机械激活离子通道蛋白PiezolMAPK/ERKl/2信号通路介导软骨细胞凋亡的机制李晓飞张钊李晓东王天宝张海宁通过【摘要】目的探讨新型机械激活离子通道蛋白Piezol是否参与调控关节软骨损伤患者软骨细胞的过度凋亡及Piezol介导的细胞凋亡是否以经典丝裂原激活的蛋白激酶(MAPK)信号通路细胞外反应激酶(ERK)1/2为下游信号通路启动细胞凋亡。方法体外培养关节软骨损伤患者退变软骨细胞,利用多通道细胞牵张应力加载系统FX-4000T处理软骨细胞,根据预实验结果分成0、2、12、24、48h牵张应力组和相应的抑制剂红玫瑰毛蜘蛛来源刮刀样机械敏感毒剂4型(CsMTx4)组。实时聚合酶链反应(RT-PCR)检测不同力学条件刺激下各组细胞的Piezol和ERKl/2的表达量,以及抗凋亡基因B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bax/Bel-2)及凋亡效应蛋白(caspase)-3的表达量。免疫荧光定位Piezol蛋白及ERKl/2在软骨细胞的表达位置。检测各分组的凋亡情况。结果RT-PCR结果显示PizeolmRNA在退变软骨中有少量表达,12h表达量增加,24h表达量达到峰值,但48h表达量下降。GsMTx4处理后的各组表达均下降。ERKl/2、Bax/Bel-2、easpase-3的表达也出现相同趋势,2h加力组早期细胞凋亡率开始增加(0.198l比0.0214,P=0.0137),12h加力组晚期凋亡率开始增加,24h加力组的晚期细胞凋亡率最高,但48h加力组凋亡率比24h加力组有所降低(0.4971比0.7431,q=0.0359)。Piezol蛋白可以在细胞核和细胞质表达,ERKl/2在细胞质表达较多。结论机械敏感性离子通道Piezol参与骨性关节损伤的软骨细胞晚期凋亡过程,且通过MAPK/ERKl/2的经典MAPK信号通路启动细胞的凋亡过程。【关键词】软骨细胞;创伤与损伤;关节疾病;凋亡基金项目:国家自然科学基金(81171774;81272056)MechanismofthePiezolprotein-inducedapoptosisofthechondrocytesthroughtheMAPK/ERKl/2signalpathway厶Xiaofe

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