TAGLN基因过表达对乳腺癌细胞迁移和侵袭能力的影响
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收稿日期:2017-04-26基金项目:成都中医药大学科技发展基金资助项目(ZRQN1419);四川省科技厅基金资助项目(2017JY0208)作者简介:杨彧(1985-),女,四川内江人,讲师,博士,从事乳腺癌相关基础研究.*通信作者E-mail:542561225@qq.com·基础研究·TAGLN基因过表达对乳腺癌细胞迁移和侵袭能力的影响杨彧,付雯*(成都中医药大学基础医学院医学生物教研室,四川成都610000)摘要:目的研究TAGLN基因过表达对人乳腺癌细胞MDA-MB-231迁移能力和侵袭能力的影响及其分子机制。方法对MDA-MB-231细胞采用慢病毒表达系统构建TAGLN基因稳定过表达细胞株,将MDA-MB-231细胞正常培养设为空白对照组,空载体慢病毒包装感染MDA-MB-231细胞后获得的稳定转染细胞株设为空载体对照组。RealtimePCR和Westernblot检测TAGLNmRNA和蛋白表达,划痕实验和Transwell侵袭实验检测细胞迁移和侵袭能力,Westernblot检测TAGLN基因过表达后基质金属蛋白酶2(matrixmetalloproteinase-2,MMP-2)和MMP-9蛋白表达变化。结果MDA-MB-231细胞感染TAGLN基因过表达慢病毒载体后,细胞中TAGLNmRNA表达和蛋白表达升高(均P<0.01),成功构建TAGLN基因过表达稳定细胞株(231-TAGLN)。231-TAGLN细胞的体外迁移能力和侵袭能力下降,与空载体对照组和空白对照组细胞比较,差异均具有统计学意义(均P<0.01),同时伴有MMP-2和MMP-9表达水平降低(均P<0.01)。结论TAGLN基因过表达可以抑制乳腺癌细胞的迁移和侵袭,MMP-2和MMP-9基因表达下降可能参与这一过程。关键词:乳腺肿瘤/病理学;微丝蛋白质类;转录,遗传;基因表达;基质金属蛋白酶2/代谢;基质金属蛋白酶9/代谢;细胞运动;肿瘤侵润;聚合酶链反应中图分类号:R737.9;R730.23文献标志码:A文章编号:1001-1692(2017)05-0411-05EffectsofTAGLNoverexpressiononthemigrationandinvasionofbreastcancercellYangYu,FuWen(DepartmentofMedicalBiology,SchoolofBasicMedicalSciences,ChengduUniversityofTraditionalChineseMedicine,Chengdu610000,China)Abstract:ObjectiveToinvestigatetheeffectsofTAGLNoverexpressiononthemigrationandinvasionofhumanbreastcancercellMDA-MB-231andthemolecularmechanism.MethodsLentiviralexpressionsystemwasusedinMDA-MB-231cellstoconstructtheTAGLNstableoverexpressioncelllines.MDA-MB-231cellsuntreatedwereusedasblankcontrolgroupandthosestablytransfectedwithemptyvectorlentiviruswereusedascontrolgroup.TheexpressionofTAGLNmRNAa
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